以下是GB/T 《公共場(chǎng)所衛(wèi)生檢驗(yàn)方法 第3部分：空氣微生物》中對(duì)細(xì)菌總數(shù)、真菌總數(shù)、β-溶血性鏈球菌的詳細(xì)說(shuō)明：

1. 細(xì)菌總數(shù)

檢測(cè)意義

· 衛(wèi)生指標(biāo)：反映空氣中可培養(yǎng)需氧或兼性厭氧細(xì)菌的總量，用于評(píng)估空氣清潔度和人群健康風(fēng)險(xiǎn)。

· 應(yīng)用場(chǎng)景：醫(yī)院、學(xué)校、商場(chǎng)、交通工具等密閉場(chǎng)所的空氣質(zhì)量監(jiān)測(cè)。

檢測(cè)方法

1. 自然沉降法（平板暴露法）：

· 步驟：將營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板（直徑9cm）暴露于待測(cè)區(qū)域，高度1.2~1.5m，暴露時(shí)間5~15分鐘（根據(jù)污染程度調(diào)整）。

· 培養(yǎng)條件：35~37℃培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)菌落形成單位（CFU/m3）。

· 計(jì)算：
細(xì)菌總數(shù)（CFU/m3）=A?t50000?N

o N：平板菌落數(shù)；

o A：平板面積（cm2）；

o t：暴露時(shí)間（分鐘）。

2. 撞擊法（六級(jí)篩孔空氣采樣器）：

· 步驟：以28.3L/min流量采樣1~5分鐘，瓊脂平板在35~37℃培養(yǎng)48小時(shí)。

· 計(jì)算：直接讀取每立方米菌落數(shù)（CFU/m3）。

標(biāo)準(zhǔn)限值

· 普通公共場(chǎng)所（如商場(chǎng)、辦公室）：≤4,000 CFU/m3（自然沉降法，暴露5分鐘）。

· 醫(yī)院手術(shù)室：≤200 CFU/m3（撞擊法）。

注意事項(xiàng)

· 避免采樣時(shí)人員走動(dòng)或氣流干擾；

· 及時(shí)送檢，防止樣本污染或菌落過(guò)度生長(zhǎng)；

· 空白對(duì)照平板需無(wú)菌落生長(zhǎng)。

2. 真菌總數(shù)

檢測(cè)意義

· 衛(wèi)生指標(biāo)：反映空氣中霉菌和酵母菌的總量，評(píng)估過(guò)敏原、霉變風(fēng)險(xiǎn)及室內(nèi)通風(fēng)狀況。

· 健康影響：高濃度真菌可引發(fā)哮喘、過(guò)敏性肺炎等呼吸系統(tǒng)疾病。

檢測(cè)方法

1. 自然沉降法：

· 培養(yǎng)基：沙氏瓊脂培養(yǎng)基（含氯霉素，抑制細(xì)菌）。

· 暴露時(shí)間：5~15分鐘，培養(yǎng)溫度28℃培養(yǎng)5天。

2. 撞擊法：

· 采樣流量28.3L/min，培養(yǎng)條件同上。

標(biāo)準(zhǔn)限值

· 普通公共場(chǎng)所：≤1,000 CFU/m3（自然沉降法）；

· 圖書(shū)館、檔案室：≤500 CFU/m3（需防霉環(huán)境）。

注意事項(xiàng)

· 真菌菌落形態(tài)多樣（毛狀、粉末狀等），需由專(zhuān) 業(yè)人員鑒別；

· 采樣前后需檢查培養(yǎng)基是否污染；

· 夏季高溫高濕環(huán)境真菌易超標(biāo)，應(yīng)加強(qiáng)通風(fēng)。

3. β-溶血性鏈球菌（β-Hemolytic Streptococcus）

檢測(cè)意義

· 致病風(fēng)險(xiǎn)：β-溶血性鏈球菌（如A群鏈球菌）可引發(fā)咽炎、猩紅熱等呼吸道感染，是公共場(chǎng)所衛(wèi)生監(jiān)控重點(diǎn)。

檢測(cè)方法

1. 自然沉降法或撞擊法采樣：

· 培養(yǎng)基：血瓊脂平板（含5%脫纖維羊血）。

2. 培養(yǎng)與鑒定：

· 培養(yǎng)條件：35~37℃培養(yǎng)24~48小時(shí)，觀察透明溶血環(huán)（β-溶血）。

· 鏡檢確認(rèn)：革蘭氏染色陽(yáng)性鏈狀球菌，過(guò)氧化氫酶陰性。

· 生化試驗(yàn)：必要時(shí)進(jìn)行桿菌肽敏感試驗(yàn)或CAMP試驗(yàn)鑒定A/B群。

標(biāo)準(zhǔn)限值

· 公共場(chǎng)所：不得檢出β-溶血性鏈球菌（CFU/m3=0）。

注意事項(xiàng)

· 采樣后需立即送檢（鏈球菌易死亡）；

· 嚴(yán)格區(qū)分α-溶血（草綠色環(huán)）和β-溶血（透明環(huán)）；

· 陽(yáng)性樣本需溯源污染源（如患者飛沫、空調(diào)系統(tǒng)污染）。

綜合檢測(cè)要點(diǎn)

1. 采樣時(shí)間與頻率：

· 建議每日高峰時(shí)段（如商場(chǎng)營(yíng)業(yè)時(shí)間、醫(yī)院門(mén)診時(shí)間）采樣；

· 季節(jié)變化（梅雨季、冬季采暖期）增加檢測(cè)頻次。

2. 質(zhì)量控制：

· 空白對(duì)照：每批次檢測(cè)需設(shè)置未暴露的培養(yǎng)基平板，確保無(wú)污染；

· 設(shè)備校準(zhǔn)：撞擊式采樣器流量誤差≤±5%。

3. 結(jié)果解讀與干預(yù)：

· 細(xì)菌/真菌超標(biāo)：加強(qiáng)通風(fēng)換氣、紫外線消毒或使用空氣凈化設(shè)備；

· 檢出β-溶血性鏈球菌：立即排查感染源，徹底清潔消毒，必要時(shí)暫停場(chǎng)所使用。

通過(guò)上述檢測(cè)，可科學(xué)評(píng)估公共場(chǎng)所微生物污染水平，為疾病預(yù)防和衛(wèi)生管理提供依據(jù)。